mrs培养基如何配制

MS培养基的配制包括以下步骤。培养基母液的配制和保存 MS培养基含有近30种营养成分，为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分，按原量的20倍或200倍分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。

MS培养基的配制步骤
　　植物组织培养中常用的一种培养基是MS培养基。
编辑本段MS培养基的配制步骤
　　这样每次使用时，取其总量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL)，加水稀释，制成培养液。现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出，供配制时使用。 　　
大量元素(母液Ⅰ) mg/L 　　NH4NO3 33 000 　　KNO3 38 000 　　CaCl2·2H2O 8 800 　　MgSO4·7H2O 7 400 　　KH2PO4 3 400 　　
微量元素(母液Ⅱ) 　　KI 166 　　H3BO3 1 240 　　MnSO4·4H2O 4 460 　　ZnSO4·7H2O 1 720 　　Na2MoO4·2H2O 50 　　CuSO4·5H2O 5 　　CoCl2·6H2O 5 　　
铁盐(母液Ⅲ) 　　FeSO4·7H2O 5 560 　　Na2-EDTA·2H2O 7 460 　　
有机成分(母液Ⅳ)ⅣA 　　肌醇 20 000 　　ⅣB烟酸 100 　　盐酸吡哆醇(维生素B6) 100 　　盐酸硫胺素(维生素B1) 100 　　甘氨酸 400 　　
以上各种营养成分的用量，除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外，其余的均为200倍浓缩液。 　　
上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。
其中，母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1 L。 　　
母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至5?5，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。各种母液配完后，分别用玻璃瓶贮存，并且贴上标签，注明母液号、配制倍数、日期等，保存在冰箱的冷藏室中。 　　
MS培养基中还需要加入：2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)、萘乙酸(NAA)、6-苄基嘌呤(6-BA)等植物生长调节物质，并且分别配成母液(0?1 mg/mL)。其配制方法是：分别称取这3种物质各10 mg，将2，4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶，将6-BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解，溶解过程需要水浴加热，最后分别定容至100 mL，即得质量浓度为0?1 mg/mL的母液。 　　
配制培养液 用量筒或移液管从各种母液中分别取出所需的用量：母液Ⅰ为50 mL，母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5 mL。再取2，4?D 5 mL、NAA 1 mL，与各种母液一起放入烧杯中。
编辑本段MS培养基配制培养液时的注意事项
　　配制培养液时应注意： 　　①在使用提前配制的母液时，应在量取各种母液之前，轻轻摇动盛放母液的瓶子，如果发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染，应立即淘汰这种母液，重新进行配制； 　　②用量筒或移液管量取培养基母液之前，必须用所量取的母液将量筒或移液管润洗2次； 　　③量取母液时，最好将各种母液按将要量取的顺序写在纸上，量取1种，划掉1种，以免出错。溶化琼脂 用粗天平分别称取琼脂9 g、蔗糖30 g，放入1 000 mL的搪瓷量杯中，再加入蒸馏水750 mL，用电炉加热，边加热边用玻璃棒搅拌，直到液体呈半透明状。然后再将配好的混合培养液加入到煮沸的琼脂中，最后加蒸馏水定容至1 000 mL，搅拌均匀。 　　需要注意的是，在加热琼脂、制备培养基的过程中，操作者千万不能离开，否则沸腾的琼脂外溢，就需要重新称量、制备。此外，如果没有搪瓷量杯，可用大烧杯代替。但要注意大烧杯底的外表面不能沾水，否则加热时烧杯容易炸裂，使溶液外溢，造成烫伤。调pH 用滴管吸取物质的量浓度为1 mol/L的NaOH溶液，逐滴滴入溶化的培养基中，边滴边搅拌，并随时用精密的pH试纸(5.4～7.0)测培养基的pH，一直到培养基的pH为5.8为止(培养基的pH必须严格控制在5.8)。培养基的分装 溶化的培养基应该趁热分装。分装时，先将培养基倒入烧杯中，然后将烧杯中的培养基倒入锥形瓶(50 mL或100 mL)中。注意不要让培养基沾到瓶口和瓶壁上。锥形瓶中培养基的量约为锥形瓶容量的1/5～1/4。每1 000 mL培养基，可分装25～30瓶。培养基分装完毕后，应及时封盖瓶口。用2块硫酸纸(每块大小约为9 cm×9 cm)中间夹1层薄牛皮纸封盖瓶口，并用线绳捆扎。最后在锥形瓶外壁贴上标签。

mrs培养基的组织成分：
组成成 重 量(g)
牛肉蛋白粉 10
鱼肉汁 10
酵母浸出汁粉 5
葡萄糖 20
醋酸钠 5
柠檬酸二铵 2
吐温80 0.1
硫酸镁 0.58
硫酸锰 0.28
蒸溜水 1 000ml
备注：用高压锅在121℃灭菌15min，调节pH6.2～6.4
MRS改良培养基（培养用培养基）：蛋白胨10g，酵母提取物5g，牛肉膏10g，葡萄糖20g，乙酸钠5g，柠檬酸二铵2g，吐温80 1mL，硫酸镁0.58g，硫酸锰0.05g，磷酸氢二钾2g，琼脂15~17g，水1000mL。灭菌前pH调至6.12~6.2。121摄氏度灭菌20分钟。 &V &beq4)p
碳酸钙的添加量按照2%添加，碳酸钙单独干热灭菌，方法同干热灭培养皿。在倒皿前加入到培养基中摇匀即可。

酪蛋白胨 10.0克
牛肉浸取物 10.0克
酵母提取液 5.0克
葡萄糖 5.0克
乙酸钠 5.0克
柠檬酸二胺 2.0克
吐温 80 1.0克
磷酸氢二钾 2.0克
七水硫酸镁 0.2克
七水硫酸锰 0.05克
碳酸钙 20.0克
琼脂 20.0克(进口的15克)
蒸馏水 1.0升
pH6.8
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改良MRS配方是这样的：
胰蛋白胨
10
磷酸氢二钾
2
葡萄糖
20
无水醋酸钠
3
牛肉浸膏
10
柠檬酸三铵
2
酵母浸膏
5
七水硫酸镁
0.2
X-Gal
0.06
吐温-80
1ml
L-半胱氨酸
0.5
水或MJH水提液
1000ml
备注：培养基消后用5N Na0H调至pH6.8；
具体情况具体分析，想培养什么菌，要达到什么效果，根据具体情况可以自己调整！

mrs培养基的组织成分：
组成成 重 量(g)
牛肉蛋白粉 10
鱼肉汁 10
酵母浸出汁粉 5
葡萄糖 20
醋酸钠 5
柠檬酸二铵 2
吐温80 0.1
硫酸镁 0.58
硫酸锰 0.28
蒸溜水 1 000ml
备注：用高压锅在121℃灭菌15min，调节pH6.2～6.4

LC培养基只能计数干酪乳杆菌，MRS—水杨素（或山梨醇）培养基可以计数嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌；而MRS培养基可以计数这3种益生菌，通过减法原则从嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌和双歧杆菌混合物中单独计数。另外，MRS—NNLP培养基也可用于选择性计数双歧杆菌