公元前331年，希腊马其顿王亚历山大率领东征军占领波斯首都苏撒，灭亡波斯帝国，建立了地跨欧亚非的亚历山大帝国，巴勒斯坦也随之成为亚历山大帝国的一部分，希伯莱人进入持续170年的希腊化时代。在幅员辽阔的亚历山大帝国境内，被征服居民杂居交往，造成希伯莱人历史上的第二次大流散，巴勒斯坦的希伯莱人逐渐流散到南欧、地中海诸岛以及北非、中亚各地。公元前323年，亚历山大病死巴比伦。随后地跨欧亚非的庞大帝国一分为三，即安提柯王朝统治下的希腊及马其顿、托勒密王朝统治下的埃及和塞琉古王朝统治下的叙利亚。后两者为称霸东方展开了持续近百年的“叙利亚战争”，夹在中间的巴勒斯坦先隶属于托勒密王朝，公元前198年后，落入塞琉古王朝控制下。两王朝继续追随亚历山大推广希腊文化的政策，仅在巴勒斯坦一地就建立起30多座多民族杂居的希腊化城市。
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