如果是做基因克隆的话,可以直接用蓝(兰)白斑筛选.一般的克隆载体上有Lac Z基因,在IPTG和X-gal作用下能产生蓝斑,而此基因中间有多克隆位点,当你的片段基因插入时,把这个基因给破坏了,不能产生兰斑,而只是产生白斑.这样就区别开来,象PUC18/19,PBR322等最常用的质粒都有Lac Z基因.
对载体的要求:
①能在宿主细胞中复制繁殖,而且最好要有较高的自主复制能力.
②容易进入宿主细胞,而且进入效率越高越好.
③容易插入外来核酸片段,插入后不影响其进入宿主细胞和在细胞中的复制.这就要求载体DNA上要有合适的限制性核酸内切酶位点.
④容易从宿主细胞中分离纯化出来, 这才便于重组操作.
⑤有容易被识别筛选的标志,当其进入宿主细胞、或携带着外来的核酸序列进入宿主细胞都能容易被辨认和分离出来。