51问答网 > western blot中目的蛋白分子量<=30KDa（30KDa,24KDa,14KDa)时，电泳和转膜（湿转）各需要多长时间？

western blot中目的蛋白分子量<=30KDa（30KDa,24KDa,14KDa)时，电泳和转膜（湿转）各需要多长时间？

2024-12-19 06:15:50

推荐回答（1个）

回答1：

这种小分子量的蛋白半干转就可以了

30KD

电泳条件：我们实验室的100V恒压跑。跑到出来就可以裁胶转膜了。10%-12%的分离胶

半干转条件：如果裁的是2*8cm 的膜一般是0.04mA 30-40分钟

转膜：0.45 或者0.22um size 的NC/PVDF膜

24KD

电泳条件：我们实验室的100V恒压跑。跑到出来就可以裁胶转膜了。10%-12%的分离胶

半干转条件：如果裁的是2*8cm 的膜一般是0.04mA 20-30分钟

转膜：0.45 或者0.22um size 的NC/PVDF膜

14KD

电泳条件：我们实验室的100V恒压跑。跑到出来就可以裁胶转膜了。15%的分离胶

半干转条件：如果裁的是2*8cm 的膜一般是0.04mA 15-20分钟

转膜： 0.22um size 的NC/PVDF膜

为了达到最佳的优化条件，建议转完做一下丽春红或者考马斯亮蓝染色。

希望您快点找到最佳的实验条件。