提高退火温度再做吧，非特异性扩增的smear在哪都有可能。严格的说，要确定是扩增的是否是目的条带需要将产物测序的。所以不能说明样品阴性。
你提高退火温度再来一次吧，1000+bp的产物怎么会在250-500bp里，乖~
