分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下，产生了对光吸收的效应，物质对光的吸收是具有选择性的，各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理---比耳定律。
T=I/I
LogI0/I=KCL
A=KCL
其中：
T
透射比
I0
入射光强度
I
透射光强度
A
吸光度
K
吸收系数
L
溶液的光径长度
C
溶液的浓度
从以上的公式可以看出，当入射光、吸收系数和溶液的光径长度不变时，透过光是根据溶液的浓度而变化的，分光光度计的基本原理是根据上述之物理光学现象而设计的
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