先网上查看ATCC对该细胞的建议，注意你使用的培养基种类、血清浓度及类型、传代细节等。有的细胞对营养物质要求高，需要胎牛血清，而当你使用小牛血清时，可能导致细胞状态不好。消化时间的掌握与经验有关系，难消化的细胞需要放在37℃培养箱里帮助消化。若附近有显微镜，就时不时镜检，看细胞变圆了就可以，再移液器吹打几下就能吹打下来；若没有显微镜，就看培养瓶底部是不是有类似雾状，瓶底边缘有细胞开始脱落的话，就可以了。希望对你有所帮助。
最好找个会这个的带你做几遍
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