A、DNA连接酶将黏性末端的磷酸二酯键连接起来,A错误;B、限制性内切酶用于目的基因的获得和切割运载体,B正确;C、目的基因需由运载体导入受体细胞,C正确;D、基因是具有遗传效应的DNA片段,D正确.故选:A.