高二生物 基因工程 目的基因和质粒是否要用同一限制酶进行切割？

目的基因和质粒要[同时]用同一种限制性核酸内切酶切割，不然就没法连了。但最好用不同的限制酶切两端（切目的基因是不是应该切两下么），防止载体自连或目的基因自连。

啊啊，这道题。这题是这样的，你仔细看一下质粒，若用酶2切，那质粒两处酶切位点都要断，所以质粒只能用酶1切，保证其只有一个缺口。然后目的基因则只能用酶2切，这样两端才都能切下来。（若用酶1的话目的基因右端是切不了的）

希望能帮到你。

我知道LZ的问题是什么了，“同一限制酶”应该是说能识别相同碱基序列，并具有相同的切点，你这道题所说的“不同”其实是指两种限制酶识别的碱基序列和切点不同，但就题论题的话，我想是因为质粒和目的基因的碱基序列不同，才要使用不同的限制酶吧

应该用同一种限制性核酸内切酶切割，这样才能连接；
你说的“不同的酶”情况，实指切目的基因时需要用到两种酶，因为目的基因要切两头，所以为了防止自连一般都是用不同的酶来切的；而质粒只需打开它的环状结构，只切一下就行了。
切质粒的酶必定和切目的基因的两种酶之一相同

不同的目的基因要用不同的切割酶啊、当目的基因要和云载体结合的时候、目的基因和运载体要用同种酶切割、他们才能重组在一起。

质粒作为运载体，必须和目的基因用同种限制酶，否则没法拼接啊。第一节说不用同种是怎么说的？