凝血过程是一系列凝血因子被相继酶解激活的过程，最终生成凝血酶，形成纤维蛋白凝块。凝血酶的激活过程需要有Ca+2的参与。EDTA为Ca+2鳌合剂，其机制是通过与水相中的钙离子形成稳定的螯合物而阻止血液凝固。EDTA-Ca易溶于水，所以会在上层血浆中。
肝素为天然抗凝剂，是一种含硫酸基团的黏多糖，分子量为1.5万，其抗凝机制是与抗凝酶Ⅱ一起，在低浓度能抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之间的作用，并能加强抗凝血酶Ⅲ灭活丝氨酸蛋白酶，从而阻止凝血酶形成；还有抑制凝血酶的自我催化及抑制因子X的作用。所以肝素也是溶解在血浆中的。
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