取一定量的液体样品（固体需均质取悬液），一般是1ml，无菌操作置于培养基平皿内，倾注灭菌后冷却至45摄氏度的营养琼脂，待培养基冷却凝固后翻转平皿并进行培养。通过培养，接种的细菌不断分裂繁殖，可形成肉眼可见的菌落，对这些菌落进行计数，即为菌落总数测定。
