在无菌条件下进行接种。接种前，用75%酒精或擦拭消毒原种瓶外表。接种时由三人配合进行：一人负责解开菌袋两头的活结，并递给接种者；另一人负责接种，将菌种迅速接入菌袋的两端，菌种与培养料要接触坚实，剩下的人负责扎紧接种后的菌袋袋口。一般每瓶菌种可接40袋左右，适当增大接种量，有利发菌和减少杂菌侵入。接完的菌袋移入培养间。
