将原题贴上，话说的不明不白,我有点无法理解。如果理论上：用用sacⅡ单酶后能出现你的目的条带，但实际上没有酶切出目的条带（t载体有），我认为原因是T载体自连，你的目的条带没有连上！建议重连，并用菌落PCR检验，然后用酶切检验。
将原题贴上，话说的不明不白，无法理解
