做梯度PCR时,设置梯度值一般怎么结合上下游引物设?怎么让跑出的条带更特异?我一般能详细点回答更好了。

2025-01-05 04:30:57
推荐回答(2个)
回答1:

两个策略:1.提高退火温度;2.降低镁离子浓度。如果还不行就两个同时进行。

回答2:

有专门做梯度pcr的pcr仪,梯度为1°C.
PS:Tm值不是上下引物平均值-5吗?