不可行 除了3,其他都没用1.就有了培养基里的各种杂物。 应该用液体培养基,离心收集菌体,然后用生理盐水洗涤多次后面也是,完全不行之后应该用溶菌素,超声波或者压力破碎菌体。 然后要用超速离心,比如15000RPM 离心1小时,除去细胞碎片你不晓得你的这个酶的等电点怎么沉淀?如果几个蛋白等电点一样呢? 而且这样,量很少的,要细菌过量表达这个蛋白酶。 总之,之前还少一步,就是对你用的细菌进行基因改造,比如前面加入可诱导的启动子,再加个His tag之类的,这样之后可以过Ni柱来进行纯化