如图所示，以3‘为例。需要在你的已知序列上设计两条同向特异性引物。与加在3‘接头上的两条同向引物可以进行套式PCR。
只加一个引物就能扩增出来，这就是非特异性扩增。是说单一的一种引物结合在模板的两个不同位置而扩增出片段。但是你这个分别加不同的两个引物竟然都能得到相同大小的片段就不好解释。也许是你反转录之后剩下了大量的接头引物在CDNA中，从而就是不加引物也一样可以得到片段？！你可以试一下。还有就是你说的原理问题，找个商品化的产品一看就明白了。比如TAKARA的试剂盒。你上去搜搜就知道了。
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