肉毒毒素的使用浓度及用量主要是根据临床医师操作习惯及注射点的多少来确定的。这是一个非常有争议性的问题。有的医师提倡用较浓缩的溶液能够更加精确并减少溶液弥散到临近肌肉组织等副作用。相反的意见则认为浓缩的溶液较难操作且浪费。他们还认为在像额肌等部位弥散是一种优势,可以减少我们的注射单元(注射点)。
文献中报道的稀释浓度从100U/ml到10U/ml不等。大部分的皮肤科医师使用于面部的稀释浓度为100-33.3U/ml。有研究者发现浓度在100U/ml到10U/ml之间的肉毒毒素达到的治疗效果及效果持续时间是一致的。另一项研究发现高稀释度的肉毒毒素前额注射时起效的范围更大。Carruthers等研究发现更高浓度(5U/0.05ml)剂量比较稀释(5U/0.25ml)剂量的肉毒毒素在治疗眶周皱纹时更有效,但是统计学上差异无意义(试验样本量太小)。低浓度高容量的用法使用过程中疼痛感更明显。
Hsu等建议理想策略是对于较小的肌群使用高浓度低容量注射,而对于较大的肌群像额肌则应采用低浓度高容量注射。他们还建议注射较高浓度肉毒毒素时应该使用较短针头的注射器。
尽管肉毒毒素厂商建议肉毒毒素稀释时应该使用不含防腐剂的生理盐水,但很多研究显示没有必要。少量研究发现用含防腐剂的生理盐水稀释肉毒毒素治疗面部上半部分的动态线及自发性睑挛缩可以减少使用时的疼痛感,并且安全性和效果与厂商推荐方法无差别。可能是含防腐剂的生理盐水中含有的苯甲醇起到麻醉效果能够减少疼痛感。最近还有研究报道用2%利多卡因稀释肉毒毒素可以用来治疗腋窝多汗症并有效的减少疼痛感。