安捷伦1200高效液相色谱仪分析同一种物质，用同一种方法，用同一种流动相为什么会有不同的保留时间。

柱子是不是完全相同呢？如果不同就会有不同的保留时间，也很正常嘛。就算是用完全相同的方法及柱子，不同的仪器也会因死时间或死体积不同出峰时间有差异，再就是同一色谱柱用的时间长了，也会使保留时间有变化的。主要是因为一些样品的残留，再加上柱效本身下降而改变了保留机制。

柱温，环境温度有没有什么大的变化？这两个因素对保留时间也有影响的，如果这两天正好有大的降温，是会影响到出峰的时间；还有，你说的同一流动相是同一配方还是前一天用了，今天继续用？如果只是配方相同的话，就有可能因为流动相里有机物含量的差别造成保留时间不同

是同一天吗?相差多少呢?HPLC的保留时间会有可能存在一定的漂移,所以通常我们会寻找正负0.5min内的峰来做比较.如果差得超过这个范围,就可能是1）仪器存在问题，比如没有平衡好；2）方法的耐用性不好，微小的参数偏差会造成很大的波动

抽半天的时间 把柱子好好冲一下，自动梯度的冲，基线完全平衡好了再进样，进样量不要太大（我发现过了7微升峰就有点飘了），还有 就是容许有少许的差别，只要不是太大就可以。

朋友，偶然的吧 柱温一样吗？
对出口流动相的流量可以用机器的自检功能检测下，是否流量恒定。

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