求食品微生物检验，菌落总数及大肠杆菌测定所需工具，程序，步骤，方法。谢谢。

1mL(g)X3 0.1mL(g)X3 0.01mL(g)X3 100mL(g) 下 限 上 限 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 2 3 <30 30 60 90 <5
90
0 0 0 0 1 1 1 1 0 1 2 3 30 60 90 120 <5 130
0 0 0 0 2 2 2 2 0 1 2 3 60 90 120 160

0 0 0 0 3 3 3 3 0 1 2 3 90 130 160 190
1 1 1 1 0 0 0 0 0 1 2 3 40 70 110 150 <5 10
200 210
1 1 1 1 1 1 1 1 0 1 2 3 70 110 150 190 10 30
230 360
2 2 2 2 0 0 0 0 0 1 2 3 90 140 200 260 10 30
360 370
3 3 3 3
0 0 0 0
0 1 2 3
230 390 640 950
40 70 150
1200 1300 3800
注1:本表采用3个稀释度[1mL(g)、0.1mL(g)、0.01mL(g)]，每稀释度三管 注2：表内所列数量如改用10mL(g)、1mL(g)和0.1mL(g)时，表内数字应相应降低10倍；如改用0.1mL(g)、0.01mL(g)、0.001mL(g)时，则表内数字应相应增加10

1 大肠菌群最可能数（MPN）检索表 附件3 附件3
GB/T4789.15-2003
食品卫生微生物学检验
霉菌和酵母计数
1 范围
本标准规定了食品中大肠菌群的测定方法。 本标准适用于食品中大肠菌群的测定。 2 引用标准
GB 4789.28 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂 3 设备和材料 3.1 冰箱：0～4℃。 3.2 恒温培养箱：25～28℃。 3.3 恒温振荡器。 3.4 显微镜：10X～100X。
3.5 架盘药物天平：0～500 g，精确至0.5 g。 3.6 灭菌具玻塞锥形瓶：300 mL。 3.7 灭菌广口瓶：500 mL。。
3.8 灭菌吸管：1 mL（具0.01 mL刻度）、10 mL（具0.1 mL刻度）。 3.9 灭菌平皿。
3.10 灭菌试管：16mmX160mm。 3.11 载玻片、盖玻片。 3.12 灭菌牛皮纸袋、塑料袋。 3.13 灭菌金属勺、刀。
倍。其余可类推。

4 培养基和试剂
4.1 马铃薯-葡萄糖琼脂培养基，附加抗菌素按GB/T 4789.28中4.78规定。 4.2 孟加拉红培养基：按GB/T 4789.28中4.25沥规定。 4.3 灭菌蒸馏水。 5 检验程序
检样 粮 食 块状食品 粉状食品 液状食品 糊状食品
25g+225ml无菌水 25ml+225ml无菌水

做成几个适当倍数的稀释液
选择三个适宜稀释度，各取1mL加入灭菌平皿内
每皿加入适量培养基（可先用马铃薯-葡萄糖琼脂附加抗菌素、高盐察氏培养基或孟培养基）
菌落计数
25℃～28℃ 5d
报 告
6 操作步骤
6.1 以无菌操作将检样25mL(或g)放于含有225mL灭菌生理盐水的具塞锥形瓶中30min，即为1∶10稀释液。
6.2 用1mL灭菌吸管吸取1∶10稀释液10mL，注入灭菌试管中，另用1mL灭菌吸管吸50次，使霉菌孢子充分散开。
6.3 取1mL1∶10稀释注入含有9 mL灭菌水的试管中，另换一支1mL灭菌吸管吹吸此液为1：100稀释液。
6.4 按上述操作顺序做10倍递增稀释液，每稀释一次，换用一支1mL，灭菌吸管，
样品污染情况的估计，选择三个合适的稀释度，分别在做10倍稀释的同时，吸取1
液于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿，然后将晾至45℃左右的培养基注入平皿
转动平皿使之与样液混匀，待琼脂凝固后，倒臵于25～28℃温箱中，3d后开始观察养观察5d。 6.5 计算方法：
通常选择菌落数在10～150之间的平皿进行计数，同稀释度的两个平皿菌落平均
稀释倍数，即为每克（或毫升）检样中所含霉菌和酵母数。稀释度选择及菌落报告方考GB/T4789.2。
6.6 报告：每克（或毫升）食品所含霉菌和酵母数以cfu/g(mL)。