Western Blot前一定要做蛋白浓度测定吗

2025-03-12 20:27:30
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回答1:

Western
Blot前不一定要做蛋白浓度测定的
首先Western
Blot本身也是一种半定量的检测方法,如果内参准确而且内参的量一致,可以不去计较需检测蛋白的浓度
而且需要Western
Blot检测的蛋白可能是表达的蛋白,检测浓度也只能是检测组分内的总浓度,未必能精确的检测出目的蛋白的浓度
所以Western
Blot前不一定要做蛋白浓度测定的

回答2:

western
blot中蛋白样品调节浓度有很多方法
先检测出各个蛋白样品的浓度,根据体积通过不同单位的loading
buffer将样品稀释成不同的体积,即可以保证各个蛋白样品浓度一致
或者在样品裂解的时候,用裂解液或者pbs去稀释蛋白样品,达到调节浓度的目的