如何生产栽培北虫草种?

2025-02-24 22:44:25
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栽培种分固体菌种和液体菌种两种。固体菌种的培养基以大米为主,配以营养液。营养液组成多种多样。较普通的为蔗糖2%,蛋白胨1%,磷酸二氢钾1%,硫酸镁0.5%,维生素B 0.02%。配制时大米与营养液按重量比1∶1.2的比例分装于三角瓶或罐头瓶中,每瓶大米30克,营养液36毫升。也可用大米25克,麦麸5克。或大米25克,蚕蛹粉5克。后两组的营养液应增加一些,按1.5的比例加入45毫升。

液体菌种培养基配方也较多,除了前边用于母种扩大的培养基(不加琼脂)外,还可用以下配方。

(1)葡萄糖2%,黄豆粉1%,磷酸二氢钾0.3%,硫酸镁0.04%,味精0.01%,食盐0.03%,维生素B 0.025%。

(2)葡萄糖3%,蛋白胨2%,磷酸二氢钾0.05%,食盐0.25%。

(3)葡萄糖2%,蛋白胨1%,酵母粉1%,磷酸二氢钾0.04%,硫酸镁0.04%,食盐0.05%,维生素B 0.02%。

以上培养基中,黄豆粉及酵母粉可按比例先称好分放三角瓶中。其他则按配方分别称量好,配成水溶液加入三角瓶。用容量500毫升三角瓶,每瓶可放培养液150~200毫升。常规塞上棉塞,包上牛皮纸。用线绳扎好即可。

固体或液体培养基做好后,都必须进行消毒灭菌。高压灭菌(147千帕30至40分钟),常压则要4小时。灭菌后要等温度自然下降到25℃,才能准备接种。一支二级母种可接6至8瓶固体培养基,接种时在酒精灯旁操作。一个人或两个人配合进行均可。主要动作要快,尽量减少菌种在容器外移动的时间,试管及瓶子开口的时间,以杜绝杂菌污染机会。一支母种可以接6~10瓶液体用。接种后固体培养放在20℃以下条件发菌,2~3天就萌发新菌丝。由于固体栽培种主要是为获取大量菌丝,菌丝生长不需要光,所以除检查生长情况瓶子见光外,瓶子应避光,可用黑布罩起培养架。一般10~14天菌丝可长满大米培养基。待用。液体种子除在黑暗条件下培养外,还需要一定的设备,较普遍用的是摇床,也叫摇瓶机,是液体菌种进行震荡培养的设备。分往复式和旋转式两种。前者的摇荡频率是每分钟80~120次。结构比较简单,由电动机、连杆、减速皮带、偏心轮和装有滚动活轮的搁盘组成,搁盘可放两排三角瓶。可自行设计制造。安装在有控温仪的培养室应用。后者可向有关仪器厂购进,其摇荡频率是可调的。培养北虫草用150~200转/分就可。液体菌种在摇床上生长比较快,5~7天液体中会形成大量均匀的由菌丝体组成的小球。则可作为栽培种。值得注意的是,如果培养液变混,有两种可能性,一是菌丝生长过于粘稠,但静置时菌液上表面边缘较透亮,菌液也无异常气味这属正常,否则可能是细菌污染,往往有异味,则应予以淘汰。