一般来讲,在做反转录时选用引物Oligo dt与选用随机引物Random 9mers是有差别的:
1、Random 9mers : 适用于具有HAIRPIN构造的所有RNA(rRNA、mRNA及tRNA)的反转录反应。并且合成的cDNA,任何特异型Primer Pair都可以用于PCR反应。
2、Oligo dt:适用于具有Poly(A)Tail的RNA。但是原核生物的RNA、真核生物的rRNA、tRNA、某些种类真核生物的mRNA不具有Poly(A)Tail。此引物设计巧妙,反转录效率高。
引物是一小段单链DNA或RNA,作为DNA复制的起始点,在核酸合成反应时,作为每个多核苷酸链进行延伸的出发点而起作用的多核苷酸链,在引物的3′-OH上,核苷酸以二酯链形式进行合成,因此引物的3′-OH,必须是游离的。
质粒是真核细胞细胞核外或原核生。