①将5 g新鲜完整的菠菜叶,放入研钵中,加入丙酮、石英砂、碳酸钙以后,迅速研磨,然后按要求过滤,①错误;②将滤纸条剪去两角,可保证色素带水平扩散;距边缘1.5cm处划滤液线,可防止色素溶解在层析液中,②正确;③为增强实验效果,可重复划几次,但滤液线必须划得细而齐,③错误;④将滤纸条放入层析液中,控制滤液线,不能浸入层析液;否则色素会溶解在层析液中,使实验失败,④错误.故选B.