A、图示表示基因表达载体的构建过程，这是基因工程的核心步骤，A正确；B、限制酶SmaⅠ的识别序列位于目的基因上，因此表达载体构建时不能用限制酶SmaⅠ，应用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ，B错误；C、抗卡那霉素基因属于抗性基因，其存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来，C正确；D、基因表达载体一般包括目的基因（抗原基因）、标记基因（抗卡那霉素基因）、启动子和终止子，D正确．故选：B．
