做Annexin V及PI染色不能够固定细胞。因为固定的实验操作实际上会杀死细胞，所以不能够用于关于细胞调亡的检测。
经过固定的细胞，将会对Annexin V和PI同时呈现强染色，给你假阳性结果。
所以你的时间点多也只好辛苦一点了。只有在每个时间点用活细胞染色，并且染色后一个小时内一定要检测记录好实验结果，不然时间拉长，细胞离开培养皿后逐渐调亡，染色会逐渐增强，还是给你假阳性。
为了比较多个时间点，在分批操作上得多费心保持步骤和时间的一致了。为了保险，最好给每个时间点设置一个对照组。
你把时间点倒过来，最后一起收不就行了？
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