第一次70度水浴5min为让RNA二级结构打开,便于引物结合。第一次冰浴1min为了退火,让引物能够结合RNA。37度水域是让cDNA聚合。第二次70℃水浴是再变性,让引物脱离模板RNA和cDNA第一链。第二次冰浴是为了让cDNA-RNA复性成为cDNA-RNA杂合双链。明白没有?