在创作完《大卫》后，他重返罗马，为西斯廷教堂制作壁画。经过他4年艰苦卓绝的努力，一组令人瞠目结舌的鸿篇巨制《创世纪》诞生了。
第二年，教皇朱理二世去世，新教皇列奥十世决定为他前任的陵墓制作雕像。米开朗琪罗受命制作了3尊大理石作品，《摩西》就是其中最著名的一件。
与此同时，他还在佛罗伦萨为美第奇家族修建小礼拜堂，留下了一组充满诗意的组雕《晨》、《暮》、《昼》、《夜》。同时又接受罗马教皇的委托，绘制巨幅壁画《最后的审判》，此画于1541年开工，历时6年才得以完成。
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