rommel1941(站内联系TA)PCR中可以调整的条金不止Tm一个，Mg浓度、引物、模版情况等都可以进行优化，不要纠结在这一个问题上。huaigong5(站内联系TA)如果引物特异性不好，非特异条带大量消耗DNTP等因子，就很可能P不出目的条带。跳跳鱼(站内联系TA)那你就尝试做一个温度梯度PCR找找合适的温度，达到最佳效果:hand:imyting(站内联系TA)会的，退火温度太低会导致引物大量与非特异性位点结合，导致目的基因的扩增出现问题，比如dNTP的消耗等
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