简述徒手切片的制作方法

徒手切片的制作方法：

选材→切片→固定（70％酒精）→1％番红（50％酒精溶液）染色→70％酒精冲洗→脱水（85％酒精95酒精）→0．5％固绿（95％酒精溶液）复染色→冲洗（95％酒精1次）→进一步脱水（纯酒精2～3次）→透明（1／2纯酒精十1／2二甲苯及纯二甲苯各二次）→封片（中性树胶）→贴标签。

所需的仪器用具简单，药品经济，操作方便，费时较短，且易于保持材料的天然色泽和活体结构，必要时，也可经过脱水、染色制成永久制片而保存。

扩展资料：

1、实验用品

显微镜、剃头刀（或刀片）、毛笔、镊子、培养皿、染色皿（或小酒杯）、吸管、载玻片、盖玻片、吸水纸。1％番红水溶液（或50％酒精溶液），0．5％固绿95％酒精溶液，70％、85％、95％酒精，纯酒精、二甲苯和中性树胶或加拿大树胶等。

2、选材

所用材料不宜太软或太硬。一般植物幼嫩的根茎或一些植物的叶片、叶柄等均可使用此法。质地较薄的材料，如叶片，可沿主脉两侧切成宽约5～6毫米，长1～1．5厘米的小块，夹在夹持物（如胡萝卜根或马铃薯块茎等）中进行切片。

徒手切片法是指手持刀片将新鲜的或固定的实验材料切成薄片的制作方法。徒手切片前，应先准备好一个盛有清水的培养皿。在切片时，用左手的拇指与食指、中指夹住实验材料，大拇指应低于食指2～3mm，以免被刀片割破。材料要伸出食指外约2～3mm，左手拿材料要松紧适度，右手平稳地拿住刀片并与材料成垂直。然后，在材料的切面上均匀地滴上清水，以保持材料湿润。将刀口向内对着材料，并使刀片与材料切口基本上保持平行，再用右手的臂力（不要用手的腕力）自左前方向右后方均匀地拉切。此时，左手的食指一侧应抵住刀片的下面，使刀片始终平整。连续地切下数片后，将刀片放在培养皿的水中稍一晃动，切片即漂浮于水中。当切到一定数量后，可在培养皿内挑选透明的薄片用低倍镜观察检查。好的切片应该是薄且比较透明、组织结构完整，否则要重新进行切片。

对经检查符合要求的切片，如果只作临时观察，可封藏在水中进行观察。若要更清楚地显示其组织和细胞结构，可选择一些切片进一步通过固定、染色、脱水、透明及封藏等步骤，做成永久玻片标本。